故事開始斯巴達女皇的旁白，敘說那段發生在300斯巴達勇士之外的有關特米斯托克列斯和“馬拉松戰役”的后續故事。傳說特米斯托克列斯在海灘戰役中殺死了大流士王，但放過了日后自稱“萬王之王”的薛西斯。本故事給了波斯那方十分長的篇幅敘事，有了前傳半溫不火的教訓，這次導演諾姆·穆羅在敘事上多花心思，先是在旁白中將時間軸拖后，隨后帶出幾個主要人物，然后將幾段零湊發生的事段提出，縫接一塊鋪墊后續并且讓阿特米西亞和特米斯托克列斯更加有血有肉，當故事進行到前傳即300斯巴達勇士死亡那個時間點時，特米斯托克列斯第二次前往斯巴達英雄之鄉尋求斯巴達女皇的海軍援助，并帶上陣亡國王列奧尼達斯的劍。結局一如既往從史詩般的以多敵少海戰開始，隨著斯巴達女皇的復仇帆船來到，阿特米西亞死在特米斯托克列斯面前，薛西斯轉身走向黑茫茫一片波斯陸軍，故事結束。

300勇士：帝國崛起劇情簡介
著名的馬拉松戰役中，希臘英雄特米斯托克列斯（沙利文·斯特普爾頓 Sullivan Stapleton 飾）射殺波斯國王大流士王，從此埋下薛西斯一世（羅德里格·桑托羅 Rodrigo Santoro 飾）卷土重來的禍根。在波斯王國海軍統帥阿特米西亞（伊娃·格林 Eva Green 飾）的煽動下，薛西斯率領大軍與斯巴達的領袖列奧尼達（杰拉德·巴特勒 Gerard Butler 飾）及其三百勇士在溫泉關爆發流傳千古的血戰。另一邊，阿特米西亞統帥的強大海上部隊逼近愛琴海另一邊的雅典。威望關頭，特米斯托克列斯再度站出來，和希臘的勇士們為了捍衛自由迎戰這個體內流淌著復仇之血的黑色女神。
翻云吐霧，惡浪滔天，最殘酷的殺戮在遙遠的時代進行……